LB培养基,是微生物学实验中最常用的培养基,用于培养细菌等细菌,其分为液相LB培养基,琼脂制成的固态LB培养基。加入抗生素的LB培养基可用于筛选以抗生素为主机的克隆。
一般LB培养基的名称被广泛称之为Luria-Bertani 培养基,根据该培养基的发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的解释,这个名字来源于英语的 lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基的主要成分:
序列 | 成分 | 用量 |
1 | 胰蛋白胨(tryptone) | 10g |
2 | 酵母提取物(yeast extract) | 5g |
3 | 氯化钠(NaCl) | 10g |
4 | 琼脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(900-1000) | 15-20g |
5 | 琼脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(1200-1400) |
备注:加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min
LB培养基的配制方法:
(1)称量:分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。
(2)溶化:加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。
(3)调节pH:用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。
(4)定容:将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
(5)加琼脂:加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
(6)分装、加塞、包扎。
(7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌约20min。