一、淀粉酶活性的测定实验原则：※ 淀粉酶（淀粉酶）包括几个具有不同催化特性的成员。其中，α-淀粉酶随机作用在淀粉的非还原端上，产生麦芽糖，麦芽三糖，糊精等还原糖，同时降低淀粉浆的粘度。因此，它也被称为液化酶。每次β-淀粉酶都会从淀粉的非还原端切割出一个麦芽糖分子，也称为糖化酶。葡萄糖淀粉酶每次都从淀粉的非还原末端切出一个葡萄糖。由淀粉酶产生的这些还原糖可以还原3，5-二硝基水杨酸以产生棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。淀粉酶活性的大小与产生的还原糖的量成正比。可以用麦芽糖绘制标准曲线，并且可以通过比色法确定由淀粉产生的还原糖的量。在一定时间内每单位重量样品产生的还原糖量表示酶活性。
 ※ 淀粉酶几乎存在于所有植物中，尤其是发芽后谷物种子的淀粉酶活性最强，主要是α-和β-淀粉酶。 α-淀粉酶不耐酸，在pH 3.6以下会迅速失活； β-淀粉酶不耐热，在70°C灭活15分钟。根据它们的特性，当其中一个在测量过程中被停用时，可以测量另一个的生命力。在该实验中，通过加热使β-淀粉酶失活来测量α-淀粉酶的活性，然后通过与在非钝化条件下测得的总活性（α+β）进行比较来确定β-淀粉酶的活性。

二、淀粉酶活性的测定材料，仪器和试剂

（1）材料：发芽的小麦种子（芽长约1cm）。
（2）仪器：1.分光光度计； 2.离心机； 3.恒温水浴（37°C，70°C，100°C）； 4.试管带有塞子刻度； 5.刻度移液器； 6.容量瓶。
（3）试剂（所有分析纯）：
1.标准麦芽糖溶液（1mg / ml）：准确称取100mg麦芽糖，溶于蒸馏水，稀释至100ml；
2. 3,5-二硝基水杨酸试剂：准确称取1g 3,5-二硝基水杨酸，溶于20ml 2mol / L NaOH溶液中，加50ml蒸馏水，再加30g酒石酸钾钠，待溶解后补足用蒸馏水稀释至100毫升。紧密关闭塞子，以防止二氧化碳进入。如果溶液浑浊，则可以在过滤后使用。
3.01mol / L柠檬酸缓冲液pH 5.6：溶液（0.1mol / L柠檬酸）：称量21.01g C6H8O7.H2O，用蒸馏水溶解至1L； B溶液（0.1 mol / L柠檬酸钠）：称取29.41 g Na3C6H5O7.2H2O，用蒸馏水溶解，将体积调至1L。将55ml溶液A与145ml溶液B混合，该溶液为0.1mol / L柠檬酸缓冲液pH 5.6；
4.1％淀粉溶液：称取1g淀粉，溶于100ml 0.1mol / L pH 5.6柠檬酸缓冲液中。

三、淀粉酶活性的测定实验程序（1）麦芽糖标准曲线的制备：取7个带有塞尺的干净试管，编号，并按表添加试剂（详细的教学材料）。摇匀，在沸水浴中煮沸5分钟。取出后，将自来水冷却，并用蒸馏水补足至20 ml。将1号管作为空白零点，并在540nm波长处进行比色法测量。以麦芽糖含量为水平坐标，以吸光度值为垂直坐标绘制标准曲线。
（2）酶溶液的制备：称取1g发芽3天的小麦种子（芽长约1cm），放入研钵中，加入少量石英砂和2ml蒸馏水，研成匀浆。将匀浆倒入离心管中，并用6ml蒸馏水将残余物洗至离心管中。将提取物置于室温下提取15-20分钟，每隔几分钟搅拌一次以使其完全提取。然后以3000 rpm的速度离心10分钟，将上清液倒入100 ml容量瓶中，加入蒸馏水使体积达到刻度，然后摇动成为淀粉酶的储备液。吸取10毫升上述淀粉酶原液，将其放入50毫升容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，并摇匀以得到淀粉酶稀释液。
（3）酶活性的测定：取6个带有塞子秤的干净试管，编号，并按照表（详细的教学材料）进行操作。

四、淀粉酶活性的测定实验结论：※ 结果的计算：淀粉酶活性＝ C×VT /（W×Vs×T）（mg / g / min）。式中，C为从标准曲线求出的麦芽糖含量（mg）。 VT是淀粉酶储备溶液的总体积（毫升）； Vs是反应中使用的淀粉酶储备溶液的体积（ml）； W是样品重量（g）； t它是反应时间（分钟）。