1.1. DTT

中文名称：二硫苏糖醇，1,4-二硫苏糖醇，二硫代苏糖醇，Cleland试剂

英文名称：DL-Dithiothreitol

CAS号：3483-12-3

化学式：C₄H₁₀O₂S₂，含两个巯基（-SH）的线性分子 

分子量：154.25 g/mol

外观：白色固体

溶解性：易溶于水

储存条件：-20℃

1.2. 巯基乙醇（β-ME）

中文名称：2-巯基乙醇，巯基乙醇，β-巯基乙醇

英文名称：2-Mercaptoethanol

CAS号： 60-24-2

化学式：C₂H₆OS，单巯基短链醇。  

分子量：78.13。 

外观：无色透明液体

溶解性：能与水、乙醇、乙醚和苯以任意比例混溶

储存条件：2~8℃，密封储存，防潮

还原机理：通过巯基与二硫键交换，但还原能力较弱，需较高浓度。适合pH 8-9。 可能残留部分二硫键。

1.3. TCEP•HCl

中文名称：三(2-羧乙基)膦盐酸盐，三羧基乙基膦盐酸盐

英文名称：Tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochloride

CAS号：51805-45-9

化学式：C₉H₁₅O₆P，含膦基（PH₃）的三羧酸化合物

分子量： 286.65

外观：白色粉末

溶解性：易溶于水

存储条件：-20℃或4℃保存

还原机理：直接通过亲核攻击还原二硫键，不依赖巯基，在酸性至中性（pH 1.5-8.5）均有效。无副反应（如二硫键重排）。

1.4. 2-MEA

中文名称：2-巯基乙胺盐酸盐，半胱胺盐酸盐

英文名称：2-Aminoethanethiol hydrochloride

CAS号：156-57-0

化学式：C2H8ClNS，含巯基和氨基的乙胺衍生物

分子量：113.61

外观：结晶粉末或颗粒

溶解性：在水中溶解良好

存储条件：4℃干燥保存

还原机理：巯基参与还原，氨基可能辅助结合或调节pH，适合碱性条件（pH >8）。  常用于温和条件或辅助其他反应。

图1 常用4种还原剂的结构

2.1. 还原能力与选择性

DTT/巯基乙醇：广泛用于完全还原（如SDS-PAGE），但破坏所有二硫键。 

TCEP：最强还原力，适用于低pH或长期反应。 

2-MEA：唯一可选择性剪切铰链区二硫键，保留抗体功能。  

图2 用2-巯基乙胺（2-MEA）选择性还原IgG（免疫球蛋白G）铰链区的二硫键

2.2. 稳定性与毒性

PART 03

强还原需求：首选TCEP（高效稳定）或DTT（完全还原）。 

常规低成本：巯基乙醇（注意通风防护）。 

精准剪切抗体铰链区：仅2-MEA可胜任（搭配EDTA与脱盐步骤）。

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